典型操作流程（以 SDS-PAGE 為例）

凝膠制備：根據(jù)目標(biāo)蛋白質(zhì)分子量配置凝膠（小分子用高濃度膠，如 15%；大分子用低濃度膠，如 8%），分為 “分離膠”（下層，起分離作用）和 “濃縮膠”（上層，使樣品濃縮成窄帶，提高分辨率）。

樣品處理：蛋白質(zhì)樣品與 SDS 上樣緩沖液（含 SDS、還原劑 β- 巰基乙醇、溴酚藍(lán)指示劑）混合，95℃加熱 5-10 分鐘，使蛋白質(zhì)變性并結(jié)合 SDS。

上樣與電泳：將處理好的樣品加入凝膠加樣孔，同時(shí)加入 “蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)品”（Marker），接通電源（濃縮膠用低電壓，分離膠用高電壓），溴酚藍(lán)指示劑遷移至凝膠底部時(shí)停止電泳。

檢測(cè)與分析：

染色：常用考馬斯亮藍(lán)染色（簡(jiǎn)單快速，檢測(cè)限～0.1μg）或銀染（靈敏度高，檢測(cè)限～1ng）；

成像與分析：通過(guò)凝膠成像儀拍攝條帶，結(jié)合 Marker 判斷目標(biāo)蛋白質(zhì)的分子量，通過(guò)條帶亮度半定量分析蛋白質(zhì)含量。

電泳加工的核心原理

電泳涂裝基于 “電泳、電沉積、電滲、電解” 四大電化學(xué)過(guò)程，具體流程如下：

電泳：將工件（作為陰極或陽(yáng)極）與對(duì)應(yīng)的電極板放入含有帶電涂料顆粒（如陽(yáng)離子樹(shù)脂、顏料）的電泳槽中，通直流電后，涂料顆粒因電荷作用向工件表面定向移動(dòng)。

電沉積：涂料顆粒到達(dá)工件表面后，因電場(chǎng)作用發(fā)生電化學(xué)反應(yīng)（如中和、交聯(lián)），逐漸沉積形成不溶于水的薄膜。

電滲：沉積過(guò)程中，涂層內(nèi)部的水分在電場(chǎng)作用下向槽液中遷移，使涂層逐漸致密、干燥。

電解：水在電極表面發(fā)生電解反應(yīng)（陰極產(chǎn)氫氣、陽(yáng)極產(chǎn)氧氣），此過(guò)程需通過(guò)工藝控制避免氣泡影響涂層質(zhì)量。

主要局限性

設(shè)備投資高：需建設(shè)電泳槽、超濾系統(tǒng)、高溫固化爐等專(zhuān)用設(shè)備，初期投入較大（中小型生產(chǎn)線投資通常超百萬(wàn)）。

顏色局限性：常規(guī)電泳涂料以黑色、灰色為主，彩色電泳技術(shù)難度高、成本高（需專(zhuān)用色漿，且顏色穩(wěn)定性難控制）。

工件材質(zhì)限制：主要適用于金屬工件（如鋼鐵、鋁合金），非金屬工件（如塑料、木材）需先進(jìn)行導(dǎo)電處理（如鍍膜），工藝復(fù)雜。

水洗 1（脫脂后）

目的：沖洗工件表面殘留的脫脂劑，避免帶入后續(xù)酸洗 / 磷化槽。

工藝：常溫水洗，時(shí)間 1-2 分鐘，可采用噴淋方式提率。

控制：水洗后工件表面 pH 值應(yīng)接近中性（6-8）。