其他常見(jiàn)類(lèi)型
電泳類(lèi)型 支持介質(zhì) / 形式 核心應(yīng)用場(chǎng)景
毛細(xì)管電泳(CE) 石英毛細(xì)管(內(nèi)徑 25-100μm) 微量樣品分析(如氨基酸、成分)、DNA 測(cè)序(快速)
紙電泳 濾紙 早期氨基酸、小分子肽分離(現(xiàn)已被 PAGE 替代)
等電聚焦電泳(IEF) 兩性電解質(zhì)凝膠 按蛋白質(zhì)等電點(diǎn)(pI) 分離,用于蛋白質(zhì) pI 測(cè)定、復(fù)雜樣品預(yù)分離
技術(shù)優(yōu)勢(shì)與局限性
優(yōu)勢(shì):
分辨率高:可區(qū)分結(jié)構(gòu) / 性質(zhì)極相似的物質(zhì)(如不同亞型的蛋白質(zhì)、僅差 1 個(gè)堿基的 DNA 片段);
樣品用量少:僅需微克(μg)甚至納克(ng)級(jí)樣品;
操作靈活:可通過(guò)調(diào)整介質(zhì)、緩沖液、電場(chǎng)參數(shù)適配不同樣品。
局限性:
部分技術(shù)(如 PAGE)操作較繁瑣,對(duì)實(shí)驗(yàn)條件要求高(如凝膠制備需避免氣泡);
變性電泳(如 SDS-PAGE)會(huì)破壞生物活性,無(wú)法用于活性物質(zhì)純化;
大分子物質(zhì)(如基因組 DNA)分離效率較低,需結(jié)合脈沖場(chǎng)凝膠電泳(PFGE)等特殊技術(shù)。
總之,電泳是現(xiàn)代實(shí)驗(yàn)室 “分離分析” 的基石,其技術(shù)發(fā)展(如與質(zhì)譜、色譜聯(lián)用)進(jìn)一步拓展了在醫(yī)學(xué)、組學(xué)研究等領(lǐng)域的應(yīng)用邊界。
電泳涂裝(核心:控制電場(chǎng)與槽液參數(shù))
工件掛裝:將烘干后的工件固定在掛具上,確保與電極接觸良好(掛具需定期清理,避免涂層堆積影響導(dǎo)電性)。
電泳槽浸涂:將工件放入電泳槽中,控制關(guān)鍵參數(shù):
電壓:陰極電泳通常 60-300V,陽(yáng)極電泳 20-80V(電壓越高,涂層沉積越快,但過(guò)高易產(chǎn)生針孔);
溫度:槽液溫度 20-30℃(溫度過(guò)高會(huì)導(dǎo)致涂料變質(zhì),過(guò)低則沉積效率下降);
時(shí)間:1-5 分鐘(根據(jù)涂層厚度需求調(diào)整,通常干膜厚度 20-50μm);
槽液 pH 值:陰極電泳 pH 6.0-7.5,陽(yáng)極電泳 pH 8.0-9.5(需定期監(jiān)測(cè)并調(diào)整,避免影響涂料穩(wěn)定性)。
超濾水洗:工件從電泳槽取出后,用 “超濾水”(通過(guò)超濾膜過(guò)濾的槽液)清洗表面殘留的未沉積涂料,回收涂料并減少?gòu)U水排放(環(huán)保關(guān)鍵步驟)。
水洗 1(脫脂后)
目的:沖洗工件表面殘留的脫脂劑,避免帶入后續(xù)酸洗 / 磷化槽。
工藝:常溫水洗,時(shí)間 1-2 分鐘,可采用噴淋方式提率。
控制:水洗后工件表面 pH 值應(yīng)接近中性(6-8)。