電泳的分離核心依賴遷移率（Mobility, μ） —— 即帶電粒子在單位電場(chǎng)強(qiáng)度下的移動(dòng)速度，其大小由粒子自身性質(zhì)和環(huán)境因素共同決定：
影響因素 具體作用
粒子自身性質(zhì) 1. 電荷量：電荷越多，電場(chǎng)力越大，遷移越快（如 DNA 帶負(fù)電，電荷量隨片段長度增加而增多）；
2. 分子大小：分子越小，介質(zhì)阻力越小，遷移越快（如小分子蛋白質(zhì)比大分子蛋白質(zhì)遷移快）；
3. 分子形狀：球形分子比線性 / 不規(guī)則分子阻力小，遷移更快（如球狀蛋白＞纖維狀蛋白）。
外部環(huán)境因素 1. 電場(chǎng)強(qiáng)度：電壓越高，電場(chǎng)力越強(qiáng)，遷移越快（需平衡速度與分辨率，電壓過高易導(dǎo)致發(fā)熱）；
2. 緩沖液：提供穩(wěn)定 pH（維持粒子帶電狀態(tài)）和離子強(qiáng)度（影響電場(chǎng)傳導(dǎo)與粒子穩(wěn)定性）；
3. 支持介質(zhì)：如凝膠、濾紙等，通過孔徑大小 “篩選” 不同分子（核心作用，如瓊脂糖凝膠的多孔結(jié)構(gòu)）。
技術(shù)優(yōu)勢(shì)與局限性
優(yōu)勢(shì)：
分辨率高：可區(qū)分結(jié)構(gòu) / 性質(zhì)極相似的物質(zhì)（如不同亞型的蛋白質(zhì)、僅差 1 個(gè)堿基的 DNA 片段）；
樣品用量少：僅需微克（μg）甚至納克（ng）級(jí)樣品；
操作靈活：可通過調(diào)整介質(zhì)、緩沖液、電場(chǎng)參數(shù)適配不同樣品。
局限性：
部分技術(shù)（如 PAGE）操作較繁瑣，對(duì)實(shí)驗(yàn)條件要求高（如凝膠制備需避免氣泡）；
變性電泳（如 SDS-PAGE）會(huì)破壞生物活性，無法用于活性物質(zhì)純化；
大分子物質(zhì)（如基因組 DNA）分離效率較低，需結(jié)合脈沖場(chǎng)凝膠電泳（PFGE）等特殊技術(shù)。
總之，電泳是現(xiàn)代實(shí)驗(yàn)室 “分離分析” 的基石，其技術(shù)發(fā)展（如與質(zhì)譜、色譜聯(lián)用）進(jìn)一步拓展了在醫(yī)學(xué)、組學(xué)研究等領(lǐng)域的應(yīng)用邊界。
磷化處理
目的：在工件表面形成一層均勻致密的磷酸鹽結(jié)晶膜（厚度 1-5μm），增強(qiáng)電泳涂層的附著力和耐腐蝕性。
工藝：浸入磷化液（常用鋅系、錳系），溫度 30-45℃，時(shí)間 5-10 分鐘（噴淋磷化效率更高）。
關(guān)鍵：磷化膜應(yīng)呈灰色或淺灰色，結(jié)晶均勻，無露底、發(fā)花現(xiàn)象（通過檢測(cè)膜重：2-5g/m2）。
電泳涂裝階段（核心：電場(chǎng)作用下涂料沉積）
此階段通過電場(chǎng)力使帶電涂料顆粒定向遷移并沉積在工件表面，形成均勻的濕膜。
工件掛裝
操作：將烘干后的工件固定在專用掛具上，確保工件與掛具導(dǎo)電良好（掛具需定期清理表面涂層，避免絕緣）。
注意：工件間距需均勻（通常 5-10cm），避免相互遮擋影響電場(chǎng)分布。
電泳槽浸涂
核心：工件作為電極（陰極電泳中工件為陰極，陽極電泳中為陽極），與槽內(nèi)對(duì)應(yīng)電極板形成電場(chǎng)，涂料顆粒（陽離子或陰離子）向工件遷移并沉積。
關(guān)鍵參數(shù)：
電壓：陰極電泳 60-300V，陽極電泳 20-80V（復(fù)雜工件用低電壓、長時(shí)間，簡(jiǎn)單工件用高電壓、短時(shí)間）；
溫度：槽液溫度 20-30℃（偏差需控制在 ±2℃，否則影響涂料穩(wěn)定性）；
時(shí)間：1-5 分鐘（根據(jù)目標(biāo)涂層厚度調(diào)整，干膜厚度通常 20-50μm）；
槽液參數(shù)：固體分 18%-22%、pH 值 6.0-7.5（陰極）、電導(dǎo)率 1000-2000μS/cm（需實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)調(diào)整）。
超濾水洗
目的：回收工件表面未沉積的涂料（通過超濾膜過濾槽液得到 “超濾水”），減少浪費(fèi)和廢水排放。
工藝：用超濾水噴淋或浸泡工件，時(shí)間 1-2 分鐘，回收的涂料可返回電泳槽循環(huán)使用。
純水洗（電泳后）
目的：清除殘留的超濾水和微量涂料，確保涂層表面潔凈，避免烘干后出現(xiàn)污漬。
工藝：去離子水沖洗，時(shí)間 1-2 分鐘，電導(dǎo)率＜10μS/cm。