典型操作流程(以 SDS-PAGE 為例)
凝膠制備:根據(jù)目標(biāo)蛋白質(zhì)分子量配置凝膠(小分子用高濃度膠,如 15%;大分子用低濃度膠,如 8%),分為 “分離膠”(下層,起分離作用)和 “濃縮膠”(上層,使樣品濃縮成窄帶,提高分辨率)。
樣品處理:蛋白質(zhì)樣品與 SDS 上樣緩沖液(含 SDS、還原劑 β- 巰基乙醇、溴酚藍(lán)指示劑)混合,95℃加熱 5-10 分鐘,使蛋白質(zhì)變性并結(jié)合 SDS。
上樣與電泳:將處理好的樣品加入凝膠加樣孔,同時加入 “蛋白質(zhì)分子量標(biāo)準(zhǔn)品”(Marker),接通電源(濃縮膠用低電壓,分離膠用高電壓),溴酚藍(lán)指示劑遷移至凝膠底部時停止電泳。
檢測與分析:
染色:常用考馬斯亮藍(lán)染色(簡單快速,檢測限~0.1μg)或銀染(靈敏度高,檢測限~1ng);
成像與分析:通過凝膠成像儀拍攝條帶,結(jié)合 Marker 判斷目標(biāo)蛋白質(zhì)的分子量,通過條帶亮度半定量分析蛋白質(zhì)含量。
典型應(yīng)用場景
汽車行業(yè):占電泳加工份額,用于車身、車架、車門、輪轂等核心部件的底層涂裝(后續(xù)再噴色漆和清漆)。
家電行業(yè):洗衣機(jī)內(nèi)筒、冰箱側(cè)板、空調(diào)外機(jī)殼等,要求耐潮濕、耐銹蝕的部件。
五金與工程機(jī)械:水、門鎖、軸承、挖掘機(jī)鏟斗等,需長期暴露在惡劣環(huán)境的金屬件。
醫(yī)療器械:手術(shù)器械、醫(yī)療設(shè)備外殼,要求涂層、耐(需符合 FDA 或 ISO 10993 標(biāo)準(zhǔn))。
磷化處理
目的:在工件表面形成一層均勻致密的磷酸鹽結(jié)晶膜(厚度 1-5μm),增強(qiáng)電泳涂層的附著力和耐腐蝕性。
工藝:浸入磷化液(常用鋅系、錳系),溫度 30-45℃,時間 5-10 分鐘(噴淋磷化效率更高)。
關(guān)鍵:磷化膜應(yīng)呈灰色或淺灰色,結(jié)晶均勻,無露底、發(fā)花現(xiàn)象(通過檢測膜重:2-5g/m2)。
電泳加工的工藝流程環(huán)環(huán)相扣,前處理決定附著力,電泳參數(shù)決定涂層均勻性,固化參數(shù)決定終性能。實際生產(chǎn)中需通過自動化控制系統(tǒng)實時監(jiān)控各環(huán)節(jié)參數(shù)(如槽液濃度、溫度、電壓),并定期維護(hù)設(shè)備(如超濾膜、電極板),才能穩(wěn)定產(chǎn)出高質(zhì)量的電泳涂層。該流程尤其適合大規(guī)模量產(chǎn)金屬工件(如汽車零部件、家電外殼),在保證涂層性能的同時兼顧環(huán)保性。