聚丙烯酰胺凝膠電泳(Polyacrylamide Gel Electrophoresis, PAGE)
支持介質(zhì):丙烯酰胺(Acr)與交聯(lián)劑甲叉雙丙烯酰胺(Bis)聚合形成的凝膠,孔徑可通過調(diào)整 Acr/Bis 比例控制(5%-20% 凝膠對應(yīng)不同孔徑)。
核心特點(diǎn):孔徑?。?-10nm)、分辨率(可區(qū)分分子量相差 1kDa 的蛋白質(zhì))、重復(fù)性好。
適用對象:小分子物質(zhì),如蛋白質(zhì)、小分子 DNA(<1kb)、RNA。
關(guān)鍵分支:
SDS-PAGE(十二烷基硫酸鈉 - PAGE):常用的蛋白質(zhì)分析技術(shù)。SDS 是陰離子去污劑,可使蛋白質(zhì)變性并結(jié)合等量 SDS(每克蛋白質(zhì)結(jié)合 1.4g SDS),消除蛋白質(zhì)自身電荷差異,僅通過分子大小實(shí)現(xiàn)分離,可用于蛋白質(zhì)分子量測定、純度鑒定。
Native-PAGE(非變性 PAGE):不添加 SDS 和還原劑,蛋白質(zhì)保持天然構(gòu)象和電荷,分離依賴 “電荷 + 大小 + 形狀”,可用于分析蛋白質(zhì)活性、復(fù)合物組成。
后處理(保證涂層性能穩(wěn)定)
烘干固化:將工件放入高溫烘箱,按涂料要求控制溫度(陰極電泳 160-180℃,陽極電泳 140-160℃)和時(shí)間(20-40 分鐘),使涂層交聯(lián)固化,形成終的機(jī)械性能和耐腐蝕性(固化參數(shù)直接影響涂層硬度、附著力)。
冷卻檢驗(yàn):工件自然冷卻后,檢測涂層外觀(無流掛、針孔、色差)、厚度(用膜厚儀測量)、附著力(劃格法測試,需達(dá)到 GB/T 9286 標(biāo)準(zhǔn) 0 級(jí)或 1 級(jí))、耐腐蝕性(鹽霧測試、耐溶劑測試)。
主要局限性
設(shè)備投資高:需建設(shè)電泳槽、超濾系統(tǒng)、高溫固化爐等專用設(shè)備,初期投入較大(中小型生產(chǎn)線投資通常超百萬)。
顏色局限性:常規(guī)電泳涂料以黑色、灰色為主,彩色電泳技術(shù)難度高、成本高(需專用色漿,且顏色穩(wěn)定性難控制)。
工件材質(zhì)限制:主要適用于金屬工件(如鋼鐵、鋁合金),非金屬工件(如塑料、木材)需先進(jìn)行導(dǎo)電處理(如鍍膜),工藝復(fù)雜。
水洗 1(脫脂后)
目的:沖洗工件表面殘留的脫脂劑,避免帶入后續(xù)酸洗 / 磷化槽。
工藝:常溫水洗,時(shí)間 1-2 分鐘,可采用噴淋方式提率。
控制:水洗后工件表面 pH 值應(yīng)接近中性(6-8)。