規(guī)程
1.無(wú)菌室應(yīng)設(shè)有無(wú)菌操作間和緩沖間，無(wú)菌操作間潔凈度應(yīng)達(dá)到10000級(jí)，室內(nèi)溫度保持在18-24℃，濕度保持在45-65%。超凈臺(tái)潔凈度應(yīng)達(dá)到100級(jí)。
2.無(wú)菌室應(yīng)保持清潔，嚴(yán)禁堆放雜物，以防污染。
3.嚴(yán)防一切器材和培養(yǎng)基污染，已污染者應(yīng)停止使用。
4.無(wú)菌室應(yīng)備有工作濃度的液，如5%的甲酚溶液，75%的酒精，0.1%的新潔爾滅溶液，等等。
5.無(wú)菌室應(yīng)定期用適宜的液清潔，以保證無(wú)菌室的潔凈度符合要求。
6.需要帶入無(wú)菌室使用的儀器，器械，平皿等一切物品，均應(yīng)包扎嚴(yán)密，并應(yīng)經(jīng)過(guò)適宜的方法。
7.工作人員進(jìn)入無(wú)菌室前，必須用肥皂或液洗手，然后在緩沖間更換專用工作服，鞋，帽子，口罩和手套(或用75%的乙醇再次擦拭雙手)，方可進(jìn)入無(wú)菌室進(jìn)行操作。
8.無(wú)菌室使用前必須打開(kāi)無(wú)菌室的紫外燈輻照30分鐘以上，并且同時(shí)打開(kāi)超凈臺(tái)進(jìn)行吹風(fēng)。操作完畢，應(yīng)及時(shí)清理無(wú)菌室，再用紫外燈輻照30分鐘。
9.供試品在檢查前，應(yīng)保持外包裝完整，不得開(kāi)啟，以防污染。檢查前，用75%的酒精棉球外表面。
10.每次操作過(guò)程中，均應(yīng)做陰性對(duì)照，以檢查無(wú)菌操作的可靠性。
11.吸取菌液時(shí)，必須用吸耳球吸取，切勿直接用口接觸吸管。
12.接種針每次使用前后，必須通過(guò)火焰灼燒，待冷卻后，方可接種培養(yǎng)物。
13.帶有菌液的吸管，試管，培養(yǎng)皿等器皿應(yīng)浸泡在盛有5%來(lái)蘇爾溶液的桶內(nèi)，24小時(shí)后取出沖洗。
14.凡帶有活菌的物品，必須經(jīng)后，才能在水下沖洗，嚴(yán)禁污染下水道。
在獲得了無(wú)菌環(huán)境和無(wú)菌材料后，還要保持無(wú)菌狀態(tài)，才能對(duì)某種特定的已知微生物進(jìn)行研究或利用它們的功能，否則外界的各種微生物很容易混入。外界不相干的微生物混入的現(xiàn)象，在微生物學(xué)中叫做污染雜菌。防止污染是微生物學(xué)工作中十分關(guān)鍵的技術(shù)。一方面是徹底，另一方面防止污染，是無(wú)菌技術(shù)的兩個(gè)方面。另外，還要防止所研究的微生物，特別是致病微生物或經(jīng)過(guò)基因工程改造了的本來(lái)自然界不存在的微生物從實(shí)驗(yàn)容器中逃逸到外界環(huán)境中去。為了這些目的，在微生物學(xué)中，有許多措施。
操作過(guò)程注意事項(xiàng)
1． 動(dòng)作要輕，不能太快，以免攪動(dòng)空氣增加污染；玻璃器皿也應(yīng)輕取輕放，以免破損污染環(huán)境
2． 操作應(yīng)在近火焰區(qū)進(jìn)行。
3． 接種環(huán)、接種針等金屬器材使用前后均需灼燒，灼燒時(shí)先通過(guò)內(nèi)焰，使殘物烘干后再灼燒
4． 使用吸管時(shí)，切勿用嘴直接吸、吹吸管，而必須用洗耳球操作。
5． 觀察平板時(shí)不好 開(kāi)蓋，如欲沾取菌落檢查時(shí)，必需靠近火焰區(qū)操作，平皿蓋也不能 大開(kāi)，而是上下蓋適當(dāng)開(kāi)縫。
6． 進(jìn)行可疑致病菌涂片染色時(shí)，應(yīng)使用夾子夾持玻片，切勿用手 直接拿玻片，以免造成污染，用過(guò)的玻片也應(yīng)置于液中浸泡，然后再洗滌。
7． 工作結(jié)束，收拾好工作臺(tái)上的樣品及器材，后用液擦拭工作臺(tái)。
無(wú)菌室空氣凈化工程是屬于生物凈化工程的一種，一般無(wú)菌室要求的潔凈度為萬(wàn)級(jí)，標(biāo)準(zhǔn)的微生物檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室都會(huì)專門(mén)開(kāi)辟5~8個(gè)平方出來(lái)建造無(wú)菌室，無(wú)菌室只要夠放置實(shí)驗(yàn)室樣品及必需的設(shè)備即可，面積無(wú)需過(guò)大而造成浪費(fèi)，面積過(guò)大對(duì)于做無(wú)菌室空氣凈化工程來(lái)說(shuō)不僅僅是提高建造成本而已，日后的運(yùn)行及維護(hù)費(fèi)用也會(huì)高的令人驚訝。