β-半乳糖苷酶染色衰老細胞呈藍色實驗報告-上海鄭核

一、實驗器材及試劑

1、實驗器材

名稱 廠家 型號

冰凍切片機 Thermo CRYOSTAR NX50

切片刀 上海徠卡儀器有限公司 LEICA 819

載玻片 Servicebio

正置光學顯微鏡 日本尼康 Nikon Eclipse E100

成像系統(tǒng) 日本尼康 Nikon DS-U3

2、主要實驗試劑

試劑名稱 廠家 貨號

OCT包埋劑 Sakura 4583

β-半乳糖苷酶染色固定液 碧云天生物技術有限公司 C0602-1

β-半乳糖苷酶染色液A 碧云天生物技術有限公司 C0602-2

β-半乳糖苷酶染色液B 碧云天生物技術有限公司 C0602-3

β-半乳糖苷酶染色液C 碧云天生物技術有限公司 C0602-4

X-Gal溶液 碧云天生物技術有限公司 C0602-5

甘油明膠封片劑 Servicebio G1402

二、染色步驟

1、工作液配制：染色液C 930ul，染色液A 10ul，染色液B 10ul，X-Gal溶液50ul，依次

加入，混勻即為工作液。

2、固定：取一張沒經過固定的新鮮冰凍切片自然晾干，β-半乳糖苷酶固定液固定15min，傾去固定液，蒸餾水洗3遍；

3、β-半乳糖苷酶染色：甩干片子上的水，將工作液滴于組織上，于37℃孵育16至18h。

4. 傾去工作液，蒸餾充分水洗3次。

5. 甘油明膠封片劑封片。

三、結果判讀：

衰老細胞呈藍色。

四、注意事項：

1、標本需要是新鮮的冰凍切片或細胞，不能經過固定。

2、染液需要在-20℃的條件下儲存，保質期一年。

3、工作液要現配現用，不可保存。

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