無(wú)菌室使用前必須打開(kāi)無(wú)菌室的紫外燈輻照30分鐘以上，并且同時(shí)打開(kāi)超凈臺(tái)進(jìn)行吹風(fēng)。操作完畢，應(yīng)及時(shí)清理無(wú)菌室，再用紫外燈輻照30分鐘。

供試品在檢查前，應(yīng)保持外包裝完整，不得開(kāi)啟，以防污染。檢查前，用75%的酒精棉球外表面。

每次操作過(guò)程中，均應(yīng)做陰性對(duì)照，以檢查無(wú)菌操作的可靠性。

當(dāng)前無(wú)菌室多存在于微生物工廠，一般實(shí)驗(yàn)室則使用超凈臺(tái)。超凈臺(tái)其主要功能是利用空氣層流裝置排除工作臺(tái)面上部包括微生物在內(nèi)的各種微小塵埃。通過(guò)電動(dòng)裝置使空氣通過(guò)過(guò)濾器具后進(jìn)入工作臺(tái)面，使臺(tái)面始終保持在流動(dòng)無(wú)菌空氣控制之下。而且在接近外部的一方有一道高速流動(dòng)的氣簾防止外部帶菌空氣進(jìn)入。

在條件較困難的地方，也可以用木制無(wú)菌箱代替超凈臺(tái)。無(wú)菌箱結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，便于移動(dòng)，箱正面開(kāi)有兩個(gè)洞，不操作時(shí)用推拉式小門擋住，操作時(shí)可以將雙臂伸進(jìn)去。正面上部裝有玻璃，便于在內(nèi)部操作，箱內(nèi)部裝有紫外線燈，從側(cè)面小門可以放進(jìn)去器具和菌種等。 [1]

操作過(guò)程注意事項(xiàng)

1． 動(dòng)作要輕，不能太快，以免攪動(dòng)空氣增加污染；玻璃器皿也應(yīng)輕取輕放，以免破損污染環(huán)境

2． 操作應(yīng)在近火焰區(qū)進(jìn)行。

3． 接種環(huán)、接種針等金屬器材使用前后均需灼燒，灼燒時(shí)先通過(guò)內(nèi)焰，使殘物烘干后再灼燒

4． 使用吸管時(shí)，切勿用嘴直接吸、吹吸管，而必須用洗耳球操作。

5． 觀察平板時(shí)不好 開(kāi)蓋，如欲沾取菌落檢查時(shí)，必需靠近火焰區(qū)操作，平皿蓋也不能 大開(kāi)，而是上下蓋適當(dāng)開(kāi)縫。

6． 進(jìn)行可疑致病菌涂片染色時(shí)，應(yīng)使用夾子夾持玻片，切勿用手 直接拿玻片，以免造成污染，用過(guò)的玻片也應(yīng)置于液中浸泡，然后再洗滌。

7． 工作結(jié)束，收拾好工作臺(tái)上的樣品及器材，后用液擦拭工作臺(tái)。